Marcador de peso molecular de 100pb – NOVA BIOTECNOLOGIA

Um marcador de peso molecular, também conhecido como escada de DNA ou ladder, é uma ferramenta usada em biologia molecular para estimar o tamanho de fragmentos de DNA em eletroforese em gel. Um marcador de 100 pares de base (pb) é específico para fragmentos pequenos de DNA. Ele contém uma série de fragmentos de DNA de diferentes tamanhos, tipicamente em incrementos de 100 pares de base. Por exemplo, pode incluir fragmentos de 100 pb, 200 pb, 300 pb, e assim por diante, até um limite superior, que pode ser de 1.000 pb ou mais.

Quando você realiza uma eletroforese em gel, carrega o marcador em uma das poços do gel ao lado das suas amostras de DNA. Durante a eletroforese, os fragmentos de DNA migram através do gel. Fragmentos menores se movem mais rapidamente e vão mais longe, enquanto os maiores se movem mais lentamente e não vão tão longe. Após a corrida, você pode comparar o posicionamento dos seus fragmentos de DNA com os do marcador para estimar seus tamanhos. Isso é crucial para muitas aplicações em pesquisa genética e molecular, como a clonagem de DNA, PCR, e análise de fragmentos de restrição.

• O marcador DNA Ladder 100 pb, consiste de múltiplos fragmentos de DNA que auxiliam na identificação comparativa em eletroforese em gel de agarose.
• O marcador 100 pb, consiste de múltiplas repetições de produtos de PCR e plasmídeos digeridos com enzimas de restrição apropriadas para produzir 12 fragmentos, adequados para utilizar como padrão de peso molecular para eletroforese em gel de agarose.
• O DNA inclui fragmentos que variam de 100-3.000 pares de bases. As bandas de 500 e 1.500 pares de bases têm intensidade aumentada para servir como pontos de referência. A massa aproximada de DNA em cada fragmento marcador (0,50μg por aplicação) baseados em cálculo estimado para comparar a massa do DNA em amostras de tamanho semelhante.

Aplicação:

• Identificação de massa molecular de fragmentos de DNA de fita dupla entre 100 bp a 1 Kb em géis de agarose.
• Os fragmentos podem ser identificados através de brometo de etídeo blue green ou por autorradiografia.
• Não se destina à quantificação exata de DNA em amostras.

Procedimento Recomendado:

• Para uma boa resolução recomenda-se a utilização de géis de agarose entre 1,5 – 3,0%.
• Adicionar 5,0µL do marcador por canaleta adicionando de 2µL do tampão de corrida Blue Green Loading Dye I. Agitar gentilmente e aplicar na canaleta correspondente.

Tampão de Armazenamento:

• 10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 10 mM EDTA, Orange G e Xileno cianol.

Armazenamento:

• 25°C para 2 meses.
• 4°C para 12 meses.
• -20°C para 24 meses.

Eletroforese em gel de agarose 1,5% em Fast Run Solution 1 X mostrando os fragmentos gerados a partir da aplicação de 5 µL do marcador 100 pb DNA Ladder.