Tampão TE 10X concentrado – Solução Estéril Tris EDTA pH 9,0 – NOVA BIOTECNOLOGIA
Um Tampão TE 10X concentrado – Solução Estéril Tris EDTA pH 9,0 é uma solução tamponada usada em procedimentos bioquímicos e de biologia molecular. Vamos analisar seus componentes:
- Tampão TE: TE é a abreviação de Tris-EDTA. Tris (Tris(hidroximetil)aminometano) é um composto orgânico frequentemente usado para preparar soluções tampão em bioquímica e biologia molecular. O EDTA (ácido etilenodiaminotetracético) é um agente quelante que se liga a íons metálicos e é frequentemente usado para inibir a atividade de enzimas que requerem metais.
- 10X concentrado: Isto significa que a solução é altamente concentrada e geralmente precisa ser diluída dez vezes antes de ser usada. Por exemplo, para fazer uma solução 1X a partir de uma solução 10X, você misturaria uma parte da solução 10X com nove partes de água ou outro solvente apropriado.
- Solução Estéril: A esterilização garante que não haja microrganismos vivos na solução, o que é crucial para evitar contaminações em experimentos.
- pH 9,0: O valor de pH indica a acidez ou alcalinidade da solução. Um pH de 9,0 é alcalino. O pH preciso é importante, pois muitas reações bioquímicas e atividades enzimáticas são sensíveis ao pH.
Esta solução de Tampão TE 10X concentrado é comumente usada para proteger o DNA durante o armazenamento e a manipulação, pois o EDTA inibe enzimas que podem degradar o DNA, como nucleases, e o tampão Tris mantém um ambiente de pH estável.
O tampão TE é constituído pela mistura de 100 mL de solução de Tris-HCl (1M, pH: 9,0) / 20 mL de EDTA (0,5 M, pH: 9,0), em água tipo I.
- Esta solução precisa ser diluída 1:10 para seu uso direto.
- Esta solução não precisa ser autoclavada novamente, mesmo após ser aberta para uso repetido.
- Tampão Tris-EDTA pH 9,0 (10X conc.) para recuperação antigênica induzida por calor.
- Se ocorrer formação de precipitado, aquecer a solução a 37°C por curto espaço de tempo, isto não irá alterar a qualidade do tampão.
Composição:
- 1,0 M de Tris base, pH 9.0 com HCl.
- 0,5 M EDTA.
- pH final do tampão pH: 9,0.
Armazenamento:
- Temperatura Ambiente.
Controle de Qualidade:
- Cada lote do tampão é esterilizado através de filtro de 0,1 µm.
Manipulação:
- Em contato acidental com a pele, olhos e mucosas lavar com água em abundância.
- Para evitar maiores acidentes trabalhar com máscara e equipamentos de proteção individual.