Vamos entender como age o Ágar Hektoen? Qual a sua função, preparação e Guia de Compras
O ágar Hektoen entérico (HE) é um meio de cultura para o isolamento de Shigella e Salmonella . Baseia-se no uso de sais biliares para inibição seletiva e dois sistemas indicadores: azul de bromotimol e fucsina ácida como indicadores de dissimilação de carboidratos e ferro férrico como indicador da formação de sulfeto de hidrogênio a partir de tiossulfato.
O ágar Hektoen permite um bom crescimento de Shigella spp., pois a inibição desses organismos pelos sais biliares é reduzida pela adição de quantidades relativamente grandes de peptona e carboidratos. O meio proporciona boa diferenciação colonial e inibe alguns coliformes e outras bactérias não fermentadoras de lactose, facilitando assim a identificação de Salmonella e Shigellaa partir de produtos alimentícios.
Em ágar Hektoen, Salmonella spp. produz colônias verdes transparentes ou verde-azuladas com ou sem centros pretos e aparece como colônias quase completamente pretas. Shigella spp. produz colônias verdes e transparentes. Como outros organismos formam colônias semelhantes a Salmonella e Shigella , são necessários testes bioquímicos e sorológicos de confirmação. Bactérias gram-negativas fermentadoras de lactose, sacarose ou salicina produzem colônias cor de salmão.
Composição do Ágar Hektoen
- Ingredientes Gms / Litro:
- Peptona protéica 12.000.
- Extrato de levedura 3.000.
- Lactose 12.000.
- Sacarose 12.000.
- Salicin 2.000.
- Mistura de sais biliares 9.000.
- Cloreto de sódio 5.000.
- Tiossulfato de sódio 5.000.
- Citrato de amônio férrico 1.500.
- Fucsina ácida 0,100.
- Azul de bromotimol 0,065.
- Ágar 15.000.
- pH final (a 25°C) 7,5 ± 0,2.
Para que serve o Ágar Hektoen?
O Ágar Hektoen (HE) é um meio seletivo e diferencial projetado para isolar e diferenciar membros das espécies Salmonella e Shigella de outras Enterobacteriaceae. Os sais biliares e os corantes azul de bromotimol e fucsina ácida inibem o crescimento da maioria dos organismos Gram positivos. Lactose, sacarose e salicina fornecem carboidratos fermentáveis para estimular o crescimento e a diferenciação de entéricos.
O tiossulfato de sódio fornece uma fonte de enxofre. O citrato de amônio férrico fornece uma fonte de ferro para permitir a produção de sulfeto de hidrogênio a partir de tiossulfato de sódio, que fornece uma fonte de enxofre. O citrato de amônio férrico também permite a visualização da produção de sulfeto de hidrogênio reagindo com gás sulfeto de hidrogênio para formar um precipitado preto.
Os entéricos que fermentam um ou mais dos carboidratos produzirão colônias amarelas a salmão. Os não fermentadores produzirão colônias azul-esverdeadas. Organismos que reduzem enxofre a sulfeto de hidrogênio produzirão colônias pretas ou colônias azul-esverdeadas com um centro preto.
O Ágar Hektoen é um meio diferencial moderadamente seletivo usado para o isolamento e cultura de microrganismos entéricos gram-negativos, particularmente para o isolamento de espécies de Shigella e Salmonella de amostras fecais (flora mista).
Por que é tão importante?
Dadas as graves implicações para a saúde associadas a infecções por Salmonella e Shigella, a detecção rápida e precisa destes patógenos é de suma importância. O Ágar Hektoen, com suas características distintas, torna-se uma escolha preferencial para laboratórios clínicos e de pesquisa.
3. Características do Ágar Hektoen:
- Seletividade: A presença de sais biliares e antibióticos inibe o crescimento de bactérias Gram-positivas e outras bactérias Gram-negativas não desejadas.
- Diferenciação: Os indicadores de pH e os carboidratos incorporados permitem a diferenciação com base na fermentação. Bactérias como Salmonella e Shigella produzem colônias com características de cor e aparência distintas.
Preparação do Ágar Hektoen
Suspenda os componentes, pó seco, em água (72,66 gramas em 1000 ml de água purificada/destilada). O meio é fervido por alguns segundos até que os ingredientes estejam completamente dissolvidos. Não autoclave ou superaqueça .
Resfrie a 47°C e despeje em placas de Petri. O pH final deve ser 7,5 + 0,2.
Dicas para Compradores:
- Procedência: Certifique-se de adquirir o Ágar Hektoen de fornecedores confiáveis que sigam padrões de qualidade e boas práticas de fabricação.
- Validade: Verifique sempre a data de validade no rótulo do produto. Um meio de cultura vencido pode comprometer a precisão dos resultados.
- Armazenamento: Siga as recomendações do fabricante quanto ao armazenamento, garantindo que o meio mantenha suas características ideais até o uso.
Conclusão:
O Ágar Hektoen é uma ferramenta indispensável para laboratórios que buscam precisão na detecção de patógenos entéricos. Ao adquirir esse meio, é crucial prestar atenção à qualidade, procedência e cuidados de armazenamento para garantir resultados confiáveis.
Esperamos que este guia tenha fornecido informações valiosas sobre o Ágar Hektoen e orientado de forma eficaz os futuros compradores. A microbiologia é uma área em constante evolução e, com as ferramentas certas, podemos avançar ainda mais no estudo e combate a doenças infecciosas.
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