Agarose GTG (Grau Técnico Genético) – NOVA BIOTECNOLOGIA
- Agarose grau técnico genético (GTG) é uma agarose “Low Melting Temperature” utilizada na separação por eletroforese de fragmentos de ácidos nucléicos entre 100 a 23.000 pb.
Especificações Analíticas:
- Temperatura de polimerização (gel 4%): 26°C-30°C.
- Temperatura de fusão (Melting temperature) (gel 1,5%): ≤ 65°C.
- Sensibilidade (gel 4%): ≥200 g/cm².
Aplicações:
- Separação de fragmentos acima de 1.000 pb.
- Manipulação enzimática direta de DNA.
- Separação e recuperação de fragmentos de DNA de tamanhos muito grandes.
Concentrações da Agarose-GTG sugeridas:
Mobilidade do corante:
- Taxa de migração de DNA fita dupla em relação ao azul de bromo fenol e ao xileno cianol em géis de agarose-GTG.
Precauções no uso e na preparação:
- Quando estiver realizando a fusão da agarose-GTG em temperaturas elevadas, observar cuidados para evitar queimaduras no operador e nas pessoas próximas.
- Utilizar sempre proteção para os olhos quando dissolver a agarose-GTG.
Instruções de preparação do gel de agarose em forno de micro-ondas:
- Utilizar um béquer de 2 a 4 vezes maior em volume do que a solução de agarose-GTG a ser preparada.
- Pesar a quantidade de agarose-GTG em pó necessário para a preparação do gel de interesse.
- Adicionar o tampão de eletroforese 1X ou 0.5X e misturar com auxílio de barra e agitador magnéticos dentro de um béquer.
- Retirar a barra magnética, principalmente se essa não for de teflon.
- É recomendável deixar a agarose-GTG no tampão por 5 minutos antes de colocar para aquecer. Este procedimento diminui a tendência da agarose provocar pequenas explosões durante o aquecimento.
- Cobrir o béquer com folha plástica (wrap plastic), cuidando para fazer alguns furos para ventilação e para não explodir quando em ebulição.
- Ferver a agarose por aproximadamente um minuto e, retirar com muito cuidado da fonte de calor utilizando luvas de proteção.
- Deixar esfriar a solução entre 50°C a 60°C antes de colocar no suporte de acrílico.
- Esvaziar o conteúdo dentro de um suporte de plástico com o pente e deixar polimerizar.
Armazenamento:
- Temperatura Ambiente entre 10 – 30°C.
