O que é Cultura Celular?
A cultura celular é uma ferramenta muito versátil na investigação de questões científicas básicas e de pesquisa de tradução. A vantagem do uso de linhagens celulares em pesquisas científicas é sua homogeneidade e reprodutibilidade associada nos dados gerados.
Este post apresenta os princípios por trás da configuração de um laboratório de cultura de células e as diretrizes que garantem a segurança da equipe do laboratório, bem como das células cultivadas. Ele também aborda potenciais contaminantes microbiológicos e como eles podem ser evitados, mas também detectados precocemente.
Como deve ser um laboratório de Cultura Celular?
A aplicação de técnicas de cultura de células em pesquisa biomédica requer o gerenciamento de riscos potenciais ligados a agentes infecciosos abrigados por células cultivadas (por exemplo, HBV ou HIV), mas também o controle de reagentes que podem ser de natureza tóxica, corrosiva ou mutagênica.
Esses riscos potenciais podem colocar em risco a saúde dos trabalhadores de laboratório quando introduzidos no corpo (por exemplo, através do contato da pele e membranas mucosas com sólidos, líquidos ou aerossóis) e ameaçar o meio ambiente quando manuseados de forma inadequada.
Equipamentos Recomendado para o Laboratório de Cultura Celular
Apesar das várias técnicas e ensaios realizados em diferentes laboratórios de cultura de células, o tema comum do trabalho de cultura de células é a assepsia, a criação de um microambiente livre de micro organismos patogênicos indesejados, incluindo bactérias, vírus, fungos e parasitas.
Visto que a assepsia é um componente crucial para o sucesso do trabalho de cultura de células, uma sala separada ou área designada deve ser dedicada a esse trabalho e não deve ser utilizada para outros fins.
Vamos montar um Laboratório de Cultura Celular?
Vários equipamentos de laboratório podem ajudar a alcançar tal espaço de trabalho estéril e geralmente levam a uma maior eficiência, precisão e consistência do desempenho da cultura celular
- Cabine de Segurança Biológica ( Para criar uma superfície de trabalho estéril; classe II e III recomendada)
- Incubadora CO2 ( Para fornecer um ambiente fisiológico para o crescimento celular)
- Freezer de laboratório (Para armazenar células, material celular e componentes de cultura
- Centrífuga de Laboratório (Para condensar células)
- Medidor de pH (Para determinar o pH correto dos meios de cultura)
- Meios de Cultura ( Para cultivar células em componentes desejáveis
- Contador de Células (Para contar células, determinar a cinética de crescimento e preparar densidades de revestimento adequadas
- Autoclave ( Para esterilizar pipetas e outros equipamentos em contato com as células)
- Bomba de Vácuo de Laboratório (Para aspirar meio de cultura celular)
- Banho Maria Laboratório (Para aquecer os meios de cultura de células)
- Garrafas de Cultura Celular , Frasco para o Cultivo de Células ou Placas de Petri ( Para cultura de células em diferentes formatos (por exemplo, frascos, placas de Petri, placas de 96 poços)
Legislação
No Brasil, embora não exista legislação específica para cultura de células, a Lei de Biossegurança (Lei nº 11.105/2005) e as diretrizes da ANVISA devem ser observadas. Isso assegura que as pesquisas sejam conduzidas de maneira ética e segura, protegendo tanto os pesquisadores quanto o meio ambiente.
Diretrizes para segurança de laboratório celular
- Cada trabalhador de laboratório é responsável por sua própria saúde e segurança e a de outras pessoas que possam ser afetadas pelo trabalho realizado no laboratório de cultura de células.
- O equipamento de proteção individual deve ser usado ao entrar no laboratório de cultura de células e removido ao deixar ou contaminar qualquer equipamento de proteção individual. Ao manusear agentes perigosos, as luvas potencialmente contaminadas devem ser removidas imediatamente e descartadas no lixo de risco biológico. Lavar as mãos.
- A exposição da pele em sapatos abertos, calças curtas e saias não é recomendada.
- O consumo de alimentos, bebidas, armazenamento de mantimentos, fumar, aplicar cosméticos ou manusear lentes de contato não é permitido no laboratório de cultura celular.
- Os telefones celulares não devem ser usados durante o trabalho no laboratório de cultura celular.
- Peças de roupa soltas (por exemplo, lenços, colares pendurados) devem ser removidas antes de iniciar o trabalho e o cabelo deve ser amarrado para trás.
- O laboratório de cultura de células deve ser mantido arrumado e limpo rotineiramente com um desinfetante (por exemplo, incubadoras, capelas de fluxo laminar e superfícies de trabalho).
- Todas as ferramentas de laboratório em contato com agentes potencialmente infecciosos ou perigosos devem ser descontaminadas antes e depois de trabalhar com elas. Materiais potencialmente infecciosos e perigosos devem ser descontaminados e descartados pela rota recomendada.
- Itens pontiagudos (por exemplo, pontas de pipeta) devem ser descartados imediatamente nas caixas de objetos pontiagudos designados.
- As mãos devem ser lavadas antes de sair do laboratório de cultura de células.
- O responsável de segurança do laboratório deve ser notificado sobre a exposição ou derramamento de agentes infecciosos ou perigosos para aconselhar sobre uma estratégia adequada de contenção e descontaminação.
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