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Vamos falar sobre Meio de Cultura Seletivo ? O que são esses Meios?

 

 

 

Para quem estuda a microbiologia, o meio de cultura desempenha um papel importante, especialmente no que diz respeito à seleção e isolamento de organismos. Neste artigo, vamos entender melhor o que é o meio de cultura para microbiologia e descobrir por que os meios de cultura seletivos são tão importantes para este tipo de estudo.

A microbiologia foi amplamente desenvolvida graças à descoberta e otimização dos meios de cultura. O primeiro meio de cultura artificial líquido foi criado por Louis Pasteur em 1860. Anteriormente, observava-se o crescimento bacteriano em materiais do cotidiano, como alguns alimentos.

O principal agente gelificante utilizado em meios de cultura sólidos é o ágar. No entanto, alguns limites têm sido observados no uso do ágar por causa de algumas bactérias extremamente sensíveis ao oxigênio que não crescem em meio de ágar, e outras alternativas foram propostas e testadas. Então, a descoberta de agentes antimicrobianos e seus alvos específicos levou ao surgimento de meios de cultura  seletivos. 

O que é um Meio de Cultura Seletivo?

Os microorganismos são sensíveis ao ambiente que os rodeia, e o meio de cultivo é um fator importante que influencia o crescimento e desenvolvimento das células. O meio de cultura seletivo é um tipo especial de meio de cultura que contém substâncias que permitem o crescimento apenas de alguns tipos específicos de microorganismos. Isso é útil para isolar e identificar microorganismos específicos em amostras.

Um meio de cultura seletivo é usado para isolar uma determinada espécie ou gênero bacteriano. Após a adição de vários inibidores ao meio de cultura, o objetivo desse tipo de meio é eliminar a flora microbiana indesejada.

O meio seletivo é composto por um meio básico ao qual podem ser adicionados antibióticos, produtos químicos, corantes, antissépticos, sais de sódio, fagos.

Antibióticos

Os antibióticos são os agentes seletivos mais comumente usados. Sendo seu espectro de ação bem conhecido, é mais fácil antecipar sua ação sobre as bactérias. Existe um grande número de antibióticos que podem ser usados ​​em meios de cultura, alguns dos quais são chamados de antibacterianos porque têm como alvo bactérias e outros antifúngicos porque eliminam fungos e leveduras.

Algumas moléculas têm como alvo bactérias Gram-positivas, como penicilina G, bacitracina ou vancomicina, enquanto outras têm como alvo bactérias Gram-negativas, como colistina ou polimixina B. A anfotericina B, a cicloheximida ou a nistatina têm ação contra fungos e leveduras.

 Vários antibióticos podem ser combinados para obter um meio  de cultura seletivo.

Antissépticos

Os antissépticos são mais raramente usados ​​em meios de cultura seletivos. No entanto, cetrimida ou acriflavina  podem ser encontradas em alguns meios de cultura. A clorexidina pode ser usada para selecionar Mycobacterium tuberculosis .O etanol também pode selecionar espécies bacterianas, incluindo bactérias esporuladas como Clostridioides difficile .

Cetrimide Agar Base é um meio de cultura usado para isolar e identificar seletivamente Pseudomonas aeruginosa . A cetrimida é um amônio quaternário que inibe um grande número de bactérias, incluindo as do gênero Pseudomonas , além da Pseudomonas aeruginosa.

Sais de sódio

Os sais de sódio são conhecidos por suas propriedades inibitórias. O mais conhecido é o cloreto de sódio, usado para selecionar bactérias halofílicas que resistem a quantidades muito altas de sais. Além disso, o desoxicolato de sódio tem uma forte ação solvente sobre as bactérias

O meio de cultura Marine Agar é usado para enumerar bactérias heterotróficas marinhas. É composto por uma alta concentração de sal, que elimina um grande número de bactérias e preserva as bactérias marinhas de interesse.

Substâncias químicas

Substâncias químicas podem ser adicionadas aos meios de cultura para inibir certas bactérias.

Essas substâncias inibidoras incluem telurito de potássio e sais biliares, que inibem bactérias Gram-positivas ou cloreto de lítio, que elimina bactérias Gram-negativas .

Foi desenvolvido um meio seletivo de Streptococcus pneumoniae , contendo cristal violeta. Este corante é usado para selecionar estreptococos e inibir estafilococos, bem como outras bactérias Gram-positivas.

Fagos

Bacteriófagos são vírus específicos de bactérias que podem infectar e até destruir bactérias, no caso de fagos líticos. Para isolar o Mycobacterium tuberculosis , o uso do fago lisina descontamina o escarro de outras bactérias presentes na microbiota pulmonar .

Para que finalidade são usados os Meios Seletivos?

Os meios de cultura seletivos são usados ​​para o crescimento apenas de microrganismos selecionados. Por exemplo, se um microrganismo é resistente a um determinado antibiótico, como ampicilina ou tetraciclina, então esse antibiótico pode ser adicionado ao meio para evitar que outras células, que não possuem a resistência, cresçam.

Os meios seletivos são utilizados em microbiologia para o cultivo e identificação de microorganismos específicos, como bactérias e fungos, em amostras que contêm uma mistura de diferentes tipos de microorganismos. Eles são projetados para favorecer o crescimento de determinados microorganismos enquanto inibem o de outros.

Isso é realizado através da inclusão de certos agentes químicos ou nutrientes específicos no meio. Os meios seletivos são utilizados em diversas áreas, como diagnóstico médico, controle de qualidade em indústrias de alimentos e bebidas, e pesquisa científica. Eles são essenciais para isolar e identificar patógenos em amostras clínicas ou para verificar a presença de microorganismos específicos em outros tipos de amostras.

Pontos chave

  • O meio de cultura seletivo geralmente seleciona o crescimento de um organismo desejado, interrompendo o crescimento ou matando completamente os organismos não desejados.
  • Os meios de cultura diferenciais tiram proveito das propriedades bioquímicas dos organismos-alvo, muitas vezes levando a uma mudança visível quando o crescimento dos organismos-alvo está presente.
  • Os meios diferenciais, ao contrário dos meios de cultura seletivos, não matam os organismos. Indica se um organismo alvo está presente.

Uma das aplicações mais poderosas desses tipos de meio de cultura é combinar características de meios de cultura seletivos em um único tipo de meio .

 Por exemplo, o ágar sal de manitol é usado para selecionar halófilos (por exemplo, Staphylococcus ), enquanto também diferencia visualmente espécies de estafilococos com base na fermentação de manitol ( S. aureus ) ou na incapacidade de fermentar manitol ( S. epidermidis ).

O benefício do meio de cultura seletivo, mesmo na época da tecnologia molecular

Desde a introdução na década de 1970 de diagnósticos e técnicas moleculares, incluindo PCR, sequenciamento e, mais recentemente, metagenômica, microbiologistas e outros no mundo do diagnóstico microbiano, às vezes, descobriram que essas técnicas são superiores às técnicas mais tradicionais.

Mesmo na era da tecnologia molecular, os meios de cultura seletivo mantêm um papel crucial em várias áreas, especialmente na microbiologia. Embora as técnicas moleculares ofereçam sensibilidade e especificidade elevadas, os meios de cultura seletivos continuam a ser essenciais por várias razões:

  1. Custo-efetividade: Comparados às técnicas moleculares, como a PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), os meios de cultura são mais acessíveis e econômicos, especialmente para laboratórios com recursos limitados.
  2. Simplicidade e Facilidade de Uso: Os meios de cultura seletivo não requerem equipamentos sofisticados ou treinamento especializado, o que os torna acessíveis a uma ampla gama de laboratórios, incluindo aqueles em regiões com infraestrutura limitada.
  3. Cultivo de Microorganismos Vivos: A tecnologia molecular detecta DNA ou RNA, que pode vir de células vivas ou mortas. Em contraste, os meios de cultura seletivos permitem o crescimento de microorganismos vivos, o que é essencial para estudos de fisiologia microbiana, testes de sensibilidade a antibióticos, e pesquisas que requerem culturas vivas.
  4. Identificação Preliminar e Triagem: Em muitos casos clínicos e de controle de qualidade, uma identificação preliminar rápida é necessária. Os meios de cultura seletivos podem fornecer uma indicação imediata da presença ou ausência de determinados microorganismos, facilitando a triagem inicial.
  5. Complementaridade às Técnicas Moleculares: Em muitos protocolos, as técnicas moleculares são usadas em conjunto com os meios de cultura. Por exemplo, um patógeno pode ser primeiro isolado em um meio seletivo e depois identificado ou caracterizado usando métodos moleculares.

Uma vantagem óbvia para o meio de cultura seletivo continua sendo o custo do teste. O teste de diagnóstico molecular requer reagentes caros (por exemplo, enzimas), automação dedicada ou equipamento semiautomatizado, software e, às vezes, até pessoal específico com experiência para interpretar os resultados.

Exemplos de meios seletivos

Os meios seletivos são amplamente utilizados em microbiologia para isolar e identificar diferentes tipos de microorganismos. Aqui estão alguns exemplos comuns:

  1. Ágar MacConkey: Utilizado para o isolamento de Enterobacteriaceae, como E. coli e Salmonella. Contém sais biliares e cristal violeta que inibem o crescimento de gram-positivos, e lactose para diferenciar bactérias lactose-fermentadoras de não fermentadoras.
  2. Ágar Manitol Sal: Específico para Staphylococcus aureus, este meio contém manitol, sal e um indicador de pH. S. aureus fermenta o manitol e muda a cor do meio, enquanto outros estafilococos não.
  3. Ágar Sabouraud: Muito utilizado em micologia para o cultivo de fungos, especialmente dermatófitos e leveduras. Tem um pH baixo que inibe o crescimento de muitas bactérias.
  4. Ágar XLD (Xilose Lisina Desoxicolato): Usado para isolar Salmonella e Shigella de amostras clínicas. Contém xilose, lisina, desoxicolato, lactose, sacarose e indicadores de pH.

     

Conclusão

O meio de cultura  seletivo é usado na microbiologia para permitir que apenas certos tipos de micróbios cresçam. Isso é útil porque muitas vezes os micróbios que estamos procurando são raros e precisamos de um meio que iniba o crescimento de outros micróbios. O meio de cultura seletivo também nos permite isolar um micróbio específico para estudá-lo melhor.

Os meios de cultura seletivos são usados ​​em microbiologia para o isolamento de microrganismos específicos. Eles permitem o crescimento de um determinado microrganismo, enquanto inibem o crescimento dos outros. Isso é possível devido às diferentes propriedades físico-químicas dos diferentes meios de cultura. Os meios de cultura seletivos foram apresentados a partir da necessidade de obter culturas puras para fins experimentais e clínicos.

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