Descrição
Agar Lisina Descarboxilase – Teste Bioquímico para Enterobactérias
O Agar Lisina Descarboxilase é um meio utilizado para detectar a capacidade de microrganismos, especialmente enterobactérias, de descarboxilar o aminoácido lisina. O teste é fundamental em rotinas de identificação presuntiva de espécies como Salmonella, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter e outras Enterobacteriaceae, sendo amplamente adotado em laboratórios clínicos, ambientais, industriais e de pesquisa.
A descarboxilação da lisina resulta em alcalinização do meio, permitindo leitura visual baseada em mudança de cor, o que torna o teste rápido, direto e altamente confiável.
O Agar Lisina Descarboxilase é composto por:
• Lisina: aminoácido-substrato para o teste de descarboxilação
• Glicose: fonte inicial de energia para estimular fermentação e acidificação
• Indicador púrpura de bromocresol (ou púrpura de bromocresol): indica acidificação ou alcalinização
• Peptonas e extratos: nutrientes essenciais para crescimento
• Ágar: permite execução do ensaio na superfície inclinada ou em tubos retos
O meio primeiro acidifica pela fermentação da glicose, alterando a cor para amarelo. Em seguida, se a bactéria possui a enzima lisina descarboxilase, o meio retorna ao roxo devido à alcalinização produzida pela descarboxilação.
Aplicações
O meio é indicado para:
• Identificação de enterobactérias pela descarboxilação da lisina
• Diferenciação entre Salmonella (geralmente positiva) e Citrobacter (geralmente negativa)
• Inclusão em painéis bioquímicos avançados
• Rotinas clínicas, veterinárias e ambientais
• Controle de qualidade em alimentos e água
• Pesquisa acadêmica em bacteriologia
• Triagem rápida de microrganismos Gram-negativos fermentadores
Interpretação dos Resultados
A leitura é baseada na cor final do meio após incubação**:
• Roxo (positivo): ocorre descarboxilação da lisina e alcalinização
• Amarelo (negativo):** não ocorre descarboxilação; somente fermentação da glicose
• Meio inalterado ou fraco crescimento: resultado inválido, repetir o ensaio
• Presença de bolhas ou rachaduras:possível produção de gás, dependendo da formulação
Resultados típicos:
• Salmonella spp.: geralmente positivo (roxo)
• Klebsiella e Enterobacter: frequentemente positivo
• Citrobacter spp.: geralmente negativo
• Proteus spp.: podem apresentar variações e exigem testes adicionais
Como preparar o Agar Lisina Descarboxilase
1. Suspender o meio desidratado em água purificada.
2. Aquecer até dissolução completa.
3. Esterilizar em autoclave a 121°C por 15 minutos.
4. Distribuir em tubos ou frascos, inclinados ou retos.
5. Resfriar e armazenar entre 2°C e 8°C.
Condições de Incubação
• Temperatura: 35–37°C
• Tempo: 18–24 horas (pode variar conforme espécie)
• Atmosfera: aerobiose
• Recomendação: selar o tubo com camada de óleo mineral para criar ambiente anaeróbico e evitar oxidação do indicador
Vantagens do Agar Lisina Descarboxilase
• Alta especificidade para enterobactérias
• Leitura clara e direta pela mudança de cor
• Diferenciação essencial entre Salmonella e Citrobacter
• Produção confiável e estável do meio SPLABOR
• Pode ser parte de baterias bioquímicas padronizadas
• Excelente reprodutibilidade em rotinas de alta demanda
• Fácil preparo e interpretação
Boas Práticas de Uso
• Usar culturas jovens para garantir reações bioquímicas adequadas.
• Selar o meio com óleo mineral para evitar efeitos de oxigenação.
• Sempre incluir controles positivos e negativos.
• Interpretar após o tempo recomendado, evitando leituras tardias.
• Trabalhar em fluxo laminar para evitar contaminações.
• Registrar lote, preparo, temperatura e hora de incubação para rastreabilidade.
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FAQ
*Para que serve o Agar Lisina Descarboxilase?
Para identificar microrganismos capazes de descarboxilar lisina, especialmente enterobactérias.
*Como interpretar a cor roxa?
Roxo indica descarboxilação positiva e alcalinização do meio.
*Por que o meio fica amarelo inicialmente?**
Devido à fermentação da glicose, necessária para ativar o sistema de descarboxilação.
**É necessário selar com óleo mineral?**
Sim. Isso cria ambiente anaeróbico e evita resultados falso-negativos.
Conclusão
O Agar Lisina Descarboxilase é um meio indispensável para identificação bioquímica de enterobactérias, trazendo leitura clara, reatividade confiável e excelente aplicabilidade em laboratórios clínicos, ambientais e industriais. Seu uso é fundamental em painéis de diagnóstico e ensaios confirmatórios para Salmonella, Klebsiella, Enterobacter e outras espécies de relevância sanitária.
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