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O que é Ágar Manitol? Qual a sua função e importância?

 

 

Você já ouviu falar de Ágar Manitol? Se você está no campo da microbiologia ou da biotecnologia, provavelmente já teve algum contato com ele. Se não, este post é para você! Vamos desvendar o que é o Ágar Manitol e qual a sua importância no mundo científico.

O Ágar Manitol   é usado como meio de cultura seletivo e diferencial para o isolamento e identificação de Staphylococcus aureus a partir de amostras clínicas e não clínicas.

O ágar manitol é um meio de cultura utilizado em microbiologia para o isolamento e identificação de certas bactérias, especialmente aquelas que são capazes de fermentar o manitol, um tipo de açúcar. Este meio é muitas vezes referido como “ágar manitol salino” devido à sua composição, que inclui manitol, cloreto de sódio (sal) e ágar.

Princípio do Ágar Manitol

O Ágar Manitol é baseado em dois princípios principais: seletividade e diferenciação. Vamos explorar cada um deles:

1. Seletividade

O Ágar Manitol  é seletivo porque contém ingredientes que inibem o crescimento de muitas bactérias, exceto aquelas que são do gênero Staphylococcus. Isso é normalmente alcançado através da adição de sais biliares ou cloreto de sódio em concentrações elevadas. Estes componentes criam um ambiente que é tolerável para os Staphylococci, mas inibitório para muitos outros tipos de bactérias. Assim, o meio seleciona preferencialmente as bactérias do gênero Staphylococcus, permitindo que elas cresçam enquanto suprime o crescimento de outros micro-organismos.

2. Diferenciação

O aspecto diferencial do Ágar Manitol se deve à presença do manitol (um tipo de açúcar) e de um indicador de pH, como o vermelho de fenol. Staphylococcus aureus, uma das principais espécies de interesse, é capaz de fermentar manitol. A fermentação do manitol produz ácidos, que baixam o pH do meio. Quando o pH diminui, o indicador de pH muda de cor. Por exemplo, no caso do vermelho de fenol, a cor muda de vermelho para amarelo sob condições ácidas. Portanto, se uma bactéria como o Staphylococcus aureus está presente, veremos ao redor das colônias uma mudança de cor indicando a fermentação do manitol.

Resumo do Princípio

Em resumo, o Ágar Manitol  permite que laboratórios microbiológicos isolem e identifiquem Staphylococcus, particularmente Staphylococcus aureus, através da habilidade de selecionar esses organismos e diferenciá-los com base na sua capacidade de fermentar manitol. Colônias de Staphylococcus aureus aparecem com uma zona amarela ao redor devido à acidificação do meio, enquanto outras bactérias do gênero Staphylococcus que não fermentam manitol não produzem essa mudança de cor.

 

Usos do Ágar Manitol

  1. É usado para o isolamento seletivo e diferenciação de Staphylococcus aureus de amostras clínicas.
  2. Também é usado para a enumeração de estafilococos em alimentos e produtos lácteos.
  3. Este meio de cultura também está incluído no Manual Analítico Bacteriológico para testes de cosméticos.
  4. Também é usado no exame bacteriológico de água de piscinas, spas e água potável usando filtração por membrana

Preparação de Ágar Manitol

  1. Suspenda 111,025 g de meio MRS em 1000 ml de água destilada.
  2. Ferva para dissolver completamente a mídia.
  3. Autoclave a 121°C por 15-20 minutos.

( Opcional : Adicione 5% v/v Emulsão de Gema de Ovo)

  1. Resfrie a 45-50°C e despeje em placas de Petri.

Interpretação do resultado no Ágar Manitol

A interpretação dos resultados em uma placa de Ágar Manitol  é relativamente direta, mas requer um entendimento de como o meio reage à presença de diferentes tipos de bactérias. Aqui está como você pode interpretar os resultados:

Crescimento Sem Mudança de Cor

  • Crescimento de Colônias sem Mudança de Cor: Se houver crescimento de colônias, mas o meio permanecer na sua cor original (geralmente vermelho), isso indica que as bactérias presentes não fermentam manitol. Isso pode incluir algumas espécies de Staphylococcus não patogênicas (como Staphylococcus epidermidis) ou outras bactérias que resistiram à seletividade do meio mas não fermentam manitol.

Crescimento com Mudança de Cor

  • Crescimento de Colônias com Mudança de Cor para Amarelo: Se as colônias crescerem e o meio ao redor delas mudar para amarelo, isso indica a fermentação do manitol e a produção de ácidos. Este é um resultado típico para Staphylococcus aureus, uma bactéria patogênica de interesse clínico.

Sem Crescimento

  • Ausência de Crescimento: Se não houver crescimento de colônias, isso sugere que as bactérias presentes na amostra não são capazes de crescer no ambiente seletivo do Ágar Manitol . Isso pode indicar a ausência de Staphylococcus ou a presença de outros tipos de bactérias que são completamente inibidas pelos componentes seletivos do meio.

Considerações Adicionais

  • Colônias de Diferentes Aparências: Às vezes, você pode ver diferentes tipos de colônias na mesma placa, o que pode indicar a presença de mais de um tipo de bactéria. Cada tipo de colônia deve ser interpretado individualmente.
  • Confirmação Adicional Necessária: Embora a fermentação de manitol seja um bom indicador de Staphylococcus aureus, confirmações adicionais, como testes coagulase ou análises genéticas, são frequentemente necessárias para um diagnóstico definitivo.

Em resumo, a interpretação dos resultados no Ágar Manitol baseia-se principalmente na observação do crescimento ou ausência de crescimento das colônias e se há uma mudança de cor no meio devido à fermentação do manitol. Estes resultados são usados como uma primeira etapa na identificação de Staphylococcus aureus e outras espécies de Staphylococcus.

Controle de qualidade em ágar manitol

Controle Positivo: Staphylococcus aureus ATCC 6538, colônias amarelas de tamanho médio

Controle Negativo: Escherichia coli ATCC 25922, Inibição Parcial a Completa.

Limitações do Ágar Manitol

O Ágar Manitol é um meio de cultura seletivo e diferencial usado principalmente para identificar a presença de Staphylococcus aureus. No entanto, possui várias limitações importantes:

  1. Especificidade Limitada: Pode resultar em falsos positivos com outras espécies de Staphylococcus que fermentam manitol, e falsos negativos com cepas de Staphylococcus aureus que não fermentam manitol eficientemente.
  2. Sensibilidade Variável: Algumas cepas de Staphylococcus aureus podem apresentar fermentação lenta ou fraca de manitol, complicando a interpretação dos resultados.
  3. Crescimento Inibitório: Sua seletividade impede o crescimento de muitos outros tipos de bactérias, limitando seu uso para uma análise mais ampla da flora microbiana.
  4. Necessidade de Testes Confirmatórios: Os resultados precisam ser confirmados com métodos adicionais, como testes de coagulase ou análises genéticas.
  5. Interpretação Subjetiva: A mudança de cor, um indicador chave, pode ser subjetivamente interpretada, especialmente em casos de fermentação fraca.
  6. Fatores Ambientais: A precisão dos resultados pode ser afetada por condições de incubação inadequadas.
  7. Limitação na Identificação de Espécies: Não pode diferenciar entre as diferentes espécies de Staphylococcus que fermentam manitol.

Em resumo, o Ágar Manitol é útil para indicar a possível presença de Staphylococcus aureus, mas deve ser usado em combinação com outras técnicas para uma identificação precisa.

 

 

 

Conclusão

Em resumo, o ágar manitol é uma ferramenta útil em microbiologia para diferenciar bactérias com base na capacidade de fermentar o manitol e produzir ácido. Isso é importante na identificação de patógenos bacterianos e no diagnóstico de infecções.

O Ágar Manitol é uma ferramenta valiosa no mundo da microbiologia, permitindo a identificação e estudo de bactérias específicas como o Staphylococcus aureus. Assim como outros meios de cultura, ele nos mostra a riqueza e diversidade do mundo microscópico e a importância da ciência na identificação e compreensão destes organismos.

 

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